电击感受态流程(发根农杆菌,pbi121质粒)
顺序 | 工作 |
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① | 打开电击仪,manal调为2.5,倒写F E也调为2.5,电击杯用酒精清洗后,用蒸馏水再次清洗。 |
② | 从-80℃取出需要支数的感受态(每1连接产物用33或50μl感受态,感受态在刚化开时才最有效),将冰盒内冰用冰铲拍实,提前用剪刀或手指在冰上开洞若干。 |
③ | 将感受态插入洞中,轻拿轻放。 |
④ | 若需要连接的载体质粒浓度高,则加1μl,若浓度低,则加2μl。 |
⑤ | 加入后,放入电击杯,再放入电击仪,进行电击。 |
⑥ | 将电击杯放回超净台,将内含物再次加入离心管。 |
⑦ | 电击杯用ddH2O清洗后,用擦镜纸擦干净电击面,再次加入菌液。 |