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PCR程序

PCR程序

菌液 检测阳性程序

| 顺序 | 温度 | 时间 |
| —- | —- | |
| ① | 94℃ | 05:00 |
| ② | 94℃ | 00:30 |
| ③ | 54℃(退火温度) | 00:30 |
| ④ | 72℃ | 00:45(每1000bp为1min,延伸时间) |
| ⑤ | 72℃ | 10:00 |
| ⑥ | 4℃ | 永久 |

PS:②至④步设置为25个循环。

设置降落

即为每一次循环比前一次循环温度降低固定值的温度,是为降落。

诺唯赞 克隆基因程序

顺序 温度 时间
95℃ 03:00
95℃ 00:15
54℃(退火温度) 00:15
72℃ 01:50(每1000bp为1min,延伸时间)
72℃ 5:00
4℃ 永久

PS:②至④步设置为35个循环。

酶切,连接程序

顺序 温度 时间
37℃ 30:00/60:00
4℃ 永久
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