0%

发表于 更新于 分类于

拟南芥培养流程

①种子灭菌（均需在超净台作业）：

​ 1. 30% NaClO 处理8min（用手震荡或摇床）。

​ 2. ddH2O清洗5遍（至无黄色）。

​ 3. 铺种子至1/2MS培养基。

1
（用1000μl枪头，连同水吸入，挤出至培养基，侧倾培养基，用枪头吸走水分）

​ 4. 封口膜封好后，4℃春化3天。

②放入步入式培养间（25℃）培养7天。

③移入花盆（10 * 10cm）。

1
可铺3 行 * 3 列 或 2 行 * 3 列 ，栽培用土为草碳土：蛭石3 : 1，草炭土和蛭石都需要过筛，细到粉末状。

④浇水不可过频繁，不耐旱涝。

发表于 更新于 分类于

摇菌流程（保菌，提质粒用）

①取原菌液100μl，大肠管（50ml离心管），抗生素（若为kan或其他，则为10μl，若为Zeo,则为3μl),LB液体（10ml）。

②取上述液体加至大肠管（均需在超净台作业），盖好盖子，标清载体名，摇菌时间，摇菌人。

③放入37℃摇床，摇12小时。

④取出每管中500μl至1.5ml离心管（均需在超净台作业），再加入50%甘油500μl。在离心管上标清载体名，保菌时间，保菌人。放入液氮速冻，捞出放入-81℃冰箱。

⑤将剩余菌液照提质粒试剂盒步骤操作，提出质粒后，标清质粒浓度，载体名称，提质粒时间，提质粒人。

发表于 更新于 分类于

HMMER命令行

建立模型

hmmbuild hmm文件 需要转换的文件
hmmbuild PF—.hmm PF—_seed.txt

比对

hmmsearch PF0—.hmm protein.fa > PF—.out

生成 PF—.out 文件

用notepad++打开

发表于 更新于 分类于

草木樨培养流程

①种子灭菌（均需在超净台作业）：

  1. H2SO4处理3min30s。（用手上下震荡或摇床）
  2. ddH2O清洗3遍。
  3. 75%酒精清洗3min30s。
  4. 5% NaClO 处理5-10min（用手上下震荡或摇床）。
  5. ddH2O清洗5遍。
  6. 铺种子至1/2MS培养基。
  7. 封口膜封好后，4℃春化3天。（选做）

②放入步入式培养间（25℃）培养7天。

③移入花盆（10 * 10cm）。

1
可铺3 行 * 3 列 或 2 行 * 3 列 ，栽培用土为草碳土：蛭石3 : 1，草炭土和蛭石都需要过筛，不需要细到粉末状。

④浇水不可过频繁，不耐旱涝。

发表于 更新于 分类于

引物设计

  • 酵母，根毛转化等载体引物设计—–用snapgene，需要cds序列

  • Q-pcr引物设计—-用perlprimer，需要mrna(cds)、gene序列

cds = mrna

发表于 更新于 分类于

科学研究方法

scientific method

1.Observation
2.Question
3.Research
4.Hypothesis
5.Experiment
6.Data
7.Conclusion