根毛转化之办法

1 准备材料

准备好以下材料：

• 所需基因质粒-农杆菌之板子
• 植物【白花草木樨之苗子】需要春化4 Day - 25℃培养箱培养5 Day
• 超净台（紫外线灭菌30min，后通风5min）
• 镊子，手术刀各2把（用灭菌器300℃，灭30min）
• 灭过菌的ddH2O，滤纸条（方形培养皿长度大小，宽度为其之1/3）
• 1/2MS固体培养基（每基因之每处理需用3板）

2 切根毛、侵染、暗处理与光暗培养

1. 将需用的植物每次取12颗出来放在培养皿盖内，加入ddH2O，淹没植物即可，用凉却后的手术刀切割植物根部具有根毛处，以45°斜切之方式切割，每次切割12株为宜。
2. 将两张滤纸条以平行且之间有稍许间隔，离培养皿边缘各有间隔的方式铺在1/2MS固体培养基上，
3. 将切了根冠部的植株，用镊子夹其茎部，在滤纸上吸除过多的水分。
4. 之后，使其根部在农杆菌之培养基上蘸染农杆菌（蘸染农杆菌至伤口）充分。
5. 将该植株铺在刚才铺在1/2MS固体培养基的滤纸上，使其叶片部露出滤纸，根部仍在滤纸上，每个滤纸条铺6个植株，即每个培养基可铺12个植株。
6. 铺好后，夹其滤纸条以盖被子之方式将其铺在原来培养基上的滤纸和植物根部之上，冰用镊子轻微抹平，使两滤纸亲密贴合，无空隙，紧密包围植物。
7. 随后盖好盖子，在盖子上写好标记（人名，基因名，菌名，时间，重复数名）
8. 将上述培养基封口，待所有培养基封号口后，使植物叶片位置朝上，竖立放在报纸之中，用报纸完全包裹所有的培养基，用橡皮筋或灭菌胶带扎好，标记朝上一面，始终将叶片朝上一面为朝上面，将报纸包好的培养基放入25℃培养箱，放置3Day。
9. 3Day后，拆除报纸，拿出培养皿立架，将培养皿放在立架上，仍放入25℃培养箱培养，水不足时注意补充水分。